Хроматографический анализ флавоноидного состава

Флавоноиды в траве фенхеля изучали с помощью тонкослойной хроматографии в двух системах растворителей: 1) н-бутанол - уксусная кислота - вода (4:1:2) и 2) хлороформ - уксусная кислота - вода (13:6:2) в сравнении с достоверными образцами флавоноидов в виде 0,5% спиртовых растворов. Идентификацию флавоноидов проводили в УФ и видимом свете до и после обработки 2% спиртовым раствором алюминия хлорида. Пятна флавоноидов окрашивались в грязно-желтый цвет и имели желтую флуоресценцию. Схемы хроматограмм флавоноидного состава представлены на рисунке 2.4. и 2.5.

Рис. 2.4

Рис.2.5

Примечание:

1 - гиперозид, 2 - кверцитин, 3 - вытяжка из травы фенхеля, 4 - рутин.

Таким образом, было установлено, что трава фенхеля содержит гиперозид, рутин и одно неидентифицированное вещество флавоноидной природы.

Обнаружение сапонинов

Проба пенообразования.

В пробирку помещают 3 мл водного извлечения и энергично встряхивали в течение одной минуты.

Наблюдения: появилась устойчивая пена (8 мм), не исчезающая в течение часа.

Реакции осаждения:

К 1 мл водного извлечения добавляют 4к. баритовой воды.

Наблюдения: появилось ярко-желтое окрашивание, усиливающееся при стоянии.

К 1 мл водно-спиртового извлечения добавляли 4к. 10% раствора плюмбума ацетата.

Наблюдения: появляется муть и осадок желто-бурого цвета.

К 1 мл водно-спиртового извлечения добавляли 1 мл 1% спиртового раствора холестирина.

Наблюдения: происходит помутнение вытяжки.

Цветные реакции:

Реакция Сальковского.

К 2 мл водно-спиртового экстракта прибавляли 1 мл хлороформа и 5к. концентрированной сульфатной кислоты.

Наблюдения: появлялась буро-краная окраска.

Реакция Лафона.

К 2мл водно-спиртового извлечения в пробирке прибавляли 1к. 10% раствора сульфата меди, 1мл концентрированной сульфатной кислоты и осторожно нагревали.

Наблюдения: раствор окрасился в сине-зеленый цвет .

Определение химической природы сапонинов:

В одну из пробирок поместить 5 мл 0,1М раствора хлористоводородной кислоты, а в другую - 5 мл 0,1М раствора гидроксида натрия. В обе пробирки прибавили по 3к. водного извлечения. Встряхивали в течение 1 минуты.

Наблюдения: в первой пробирке высота столбика пены - 1,5 см, пена рыхлая; во второй пробирке - 1,3 см, пена плотная, что свидетельствует о присутствии сапонинов тритерпеновой природы.

С помощью качественных реакций и хроматографических методов анализа в траве фенхеля были обнаружены вещества гликозидной природы, полисахариды, гидроксикоричные кислоты, органические кислоты, аминокислоты, кумарины, флавоноиды, конденсированные дубильные вещества, сапонины. Данные представлены в таблице 2.

Таблица 2. Обобщенная таблица идентификации БАВ в сырье фенхеля обыкновенного